Coriell Institute細(xì)胞是什么,如何進(jìn)行實(shí)驗(yàn)?
發(fā)布日期:2022-12-07 點(diǎn)擊:1285
Coriell Institute細(xì)胞是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。
成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。
Coriell Institute細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)方法:
1、在細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)貼壁MRC-5細(xì)胞,并傳代至9個(gè)T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi),將配制好的不同pH值細(xì)胞培養(yǎng)液,加到T25培養(yǎng)瓶中。
2、每天用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞的生長狀態(tài),包括細(xì)胞的形態(tài)、密度、增殖速度等,并拍照記錄,直至細(xì)胞長成致密單層為止。
3、加入適量的消化液,消化半分鐘后倒掉消化液,加入培養(yǎng)液吹打細(xì)胞至分散,制成細(xì)胞懸液。
4、顯微鏡下觀察不同pH值培養(yǎng)液中的細(xì)胞形態(tài),并用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀對細(xì)胞數(shù)量進(jìn)行計(jì)數(shù)。
30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。
細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細(xì)胞在合成和分泌細(xì)胞因子、維持血管內(nèi)外和凝血和纖溶的的動(dòng)態(tài)平衡中起重要作用。